SAMMENDRAG OG FORKLARING TESTEN
Visceral leishmaniasis, eller Kala-azar, er en spredt infeksjon forårsaket av flere underarter av L. donovani.Sykdommen anslås av Verdens helseorganisasjon (WHO) til å ramme omtrent 12 millioner mennesker i 88 land.Det overføres til mennesker ved bitt av Phlebotomus-sandfluer, som får infeksjon fra fôring av infiserte dyr.Selv om det er en sykdom som finnes i fattige land, har den i Sør-Europa blitt den ledende opportunistiske infeksjonen hos AIDS-pasienter.Identifikasjon av L. donovani-organisme fra blod, benmarg, lever, lymfeknuter eller milten gir et klart middel for diagnose.Serologisk påvisning av anti-L.donovani IgM er funnet å være en utmerket markør for akutt visceral leishmaniasis.Tester brukt i klinikken er inkludert ELISA, fluorescerende antistoff eller direkte agglutinasjonstester 4-5.Nylig har bruk av L. donovani spesifikt protein i testen forbedret sensitiviteten og spesifisiteten dramatisk.
Leishmania IgG/IgM Combo Rapid Test er en rekombinant proteinbasert serologisk test, som oppdager IgG- og IgM-antistoffer mot L. Donovani samtidig.Testen gir et pålitelig resultat innen 15 minutter uten noen instrumenter.
PRINSIPP
Leishmania IgG/IgM Rapid Test er en lateral flow kromatografisk immunanalyse.Testkassetten består av: 1) en burgunderfarget konjugatpute som inneholder rekombinant L. donovani-antigen konjugert med kolloid gull (Leishmania-konjugater) og kanin-IgG-gullkonjugater, 2) en nitrocellulosemembranstrimmel som inneholder to testbånd (T1- og T2-bånd) og et kontrollbånd (C-bånd).T1-båndet er forhåndsbelagt med monoklonalt anti-humant IgM for påvisning av anti-L.donovani IgM, T2-bånd er forhåndsbelagt med reagenser for påvisning av anti-L.donovani IgG, og C-båndet er forhåndsbelagt med geit anti-kanin IgG.
Når et tilstrekkelig volum av testprøven dispenseres inn i prøvebrønnen på kassetten, migrerer prøven ved kapillærvirkning over kassetten.L. donovani IgM hvis det finnes i prøven vil binde seg til Leishmania-konjugatene.Immunkomplekset fanges deretter på membranen av det forhåndsbelagte anti-humane IgM-antistoffet, og danner et burgunderfarget T1-bånd, som indikerer et L. donovani IgM-positivt testresultat.L. donovani IgG hvis det finnes i prøven vil binde seg til Leishmania-konjugatene.Immunkomplekset fanges deretter opp av de forhåndsbelagte reagensene på membranen, og danner et burgunderfarget T2-bånd, noe som indikerer et L. donovani IgG-positivt testresultat.
Fravær av noen T-bånd (T1 og T2) antyder et negativt resultat.Testen inneholder en intern kontroll (C-bånd) som skal vise et burgunderfarget bånd av immunkomplekset til geit-anti-kanin-IgG/kanin-IgG-gullkonjugat uavhengig av fargeutviklingen på noen av T-båndene.Ellers er testresultatet ugyldig og prøven må testes på nytt med en annen enhet.
