SAMMENDRAG OG FORKLARING TESTEN
Malaria er en myggbåren, hemolytisk, febril sykdom som infiserer over 200 millioner mennesker og dreper mer enn 1 million mennesker per år.Det er forårsaket av fire arter av Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale og P. malariae.Disse plasmodia infiserer og ødelegger menneskelige erytrocytter, og produserer frysninger, feber, anemi og splenomegali.P. falciparum forårsaker mer alvorlig sykdom enn de andre plasmodieartene og står for de fleste malariadødsfall.P. falciparum og P. vivax er de vanligste patogenene, men det er betydelig geografisk variasjon i artsfordelingen.
Tradisjonelt diagnostiseres malaria ved påvisning av organismer på Giemsa-fargede tykke utstryk av perifert blod, og de forskjellige artene av plasmodium utmerker seg ved deres utseende i infiserte erytrocytter1.Teknikken er i stand til å stille nøyaktig og pålitelig diagnose, men bare når den utføres av dyktige mikroskopister ved bruk av definerte protokoller2, noe som utgjør store hindringer for fjerntliggende og fattige områder av verden.
Malaria Pf / Pan Antigen Rapid Test Kit er utviklet for å løse disse hindringene.Testen benytter et par monoklonale og polyklonale antistoffer mot P. falciparum-spesifikt protein, histidin repetisjonsprotein II (PHRP-II), og et par monoklonale antistoffer for å plasmodium laktat dehydrogenasen (PLDH), en proteinprodusert laktat av den som er en protein-produsert av den som er en protein, en proteproduktet av den filtiske p.-plasmodiet av den plassmodiumet av den som er en prote-laktatet som er en prote. falciparum og eller noen av de tre andre plasmodia.Det kan utføres av utrent eller minimalt kvalifisert personell, uten laboratorieutstyr.
PRINSIPP
Pf/Pan Malaria Rapid Test-settet er en lateral flow kromatografisk immunanalyse.Teststrimmelkomponentene består av: 1) en burgunderfarget konjugatpute som inneholder muse-anti-pHRP-II-antistoff konjugert med kolloid gull (pHRP II-gullkonjugater) og muse-anti-pLDH-antistoff konjugert med kolloidgull (pLDH-gullkonjugater),
2) en nitrocellulosemembranstrimmel som inneholder to testbånd (Pan- og Pv-bånd) og et kontrollbånd (C-bånd).Pan-båndet er forhåndsbelagt med monoklonalt anti-pLDH-antistoff som infeksjonen med hvilken som helst av de fire artene av plasmodia kan påvises ved, Pf-båndet er forhåndsbelagt med polyklonale anti-pHRP-II-antistoffer for påvisning av Pf-infeksjon, og C-båndet er belagt med geit-anti-mus IgG.
Under analysen dispenseres et tilstrekkelig volum av blodprøven i prøvebrønnen (S) på testkassetten, en lyseringsbuffer tilsettes bufferbrønnen (B).Bufferen inneholder et vaskemiddel som lyserer de røde blodcellene og frigjør ulike plasmodiumantigener, som migrerer ved kapillærvirkning over stripen som holdes i kassetten.Hvis pHRP-II finnes i prøven, vil den binde seg til pHRP II-gullkonjugatene.Immunkomplekset fanges deretter på membranen av de forhåndsbelagte anti-pHRPII-antistoffene, og danner et burgunderfarget Pf-bånd, som indikerer et Pf-positivt testresultat.pLDH hvis det finnes i prøven vil binde seg til pLDH gullkonjugatene.Immunkomplekset fanges deretter på membranen av det forhåndsbelagte anti-pLDH-antistoffet, og danner et burgunderfarget Pan-bånd, som indikerer et plasmapositivt testresultat.I fravær av Pan-bånd kan et positivt testresultat for noen av de tre andre plasmodia anbefales.
Fravær av testbånd (Pan og Pf) antyder et negativt resultat.Testen inneholder en intern kontroll (C-bånd) som skal vise et burgunderfarget bånd av immunkomplekset til geit-anti-muse-IgG / muse-IgG (pHRP-II og pLDH-gullkonjugater) uavhengig av fargeutviklingen på noen av testbåndene.Ellers er testresultatet ugyldig og prøven må testes på nytt med en annen enhet.
