SAMMENDRAG OG FORKLARING TESTEN
Malaria er en myggbåren, hemolytisk, febril sykdom som infiserer over 200 millioner mennesker og dreper mer enn 1 million mennesker per år.Det er forårsaket av fire arter av Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale og P. malariae.Disse plasmodia infiserer og ødelegger menneskelige erytrocytter, og produserer frysninger, feber, anemi og splenomegali.P. falciparum forårsaker mer alvorlig sykdom enn de andre plasmodieartene og står for de fleste malariadødsfall.P. falciparum og P. vivax er de vanligste patogenene, men det er betydelig geografisk variasjon i artsfordelingen.
Tradisjonelt blir malaria diagnostisert ved demonstrasjon av organismer på Giemsa-fargede tykke utstryk av perifert blod, og de forskjellige artene av plasmodium utmerker seg ved deres utseende i infiserte erytrocytter.Teknikken er i stand til nøyaktig og pålitelig diagnose, men bare når den utføres av dyktige mikroskopister ved bruk av definerte protokoller, noe som utgjør store hindringer for fjerntliggende og fattige områder av verden.
Malaria Pf/Pv Ag Rapid Test er utviklet for å løse disse hindringene.Den bruker antistoffer spesifikke for P. falciparum Histidin Rich Protein-II (pHRP-II) og mot P. vivax Lactate Dehydrogenase (Pv-LDH) for samtidig å oppdage og skille infeksjon med P. falciparum og P. vivax.Testen kan utføres av utrent eller minimalt kvalifisert personell, uten laboratorieutstyr
PRINSIPP
Malaria Pf/Pv Ag Rapid Test er en lateral flow kromatografisk immunanalyse.Striptestkomponentene består av: 1) en burgunderfarget konjugatpute som inneholder muse-anti-Pv-LDH-antistoff konjugert med kolloid gull (Pv-LDH-gullkonjugater) og muse-anti-pHRP-II-antistoff konjugert med kolloidgull (pHRP-II-gullkonjugater), 2) membrankontroll a membran, Pv-strimmel og nitrogen, 2) (C-bånd).Pv-båndet er forhåndsbelagt med et annet muse-anti-Pv-LDH-spesifikt antistoff for påvisning av Pv-infeksjon, Pf-båndet er forhåndsbelagt med polyklonale anti-pHRP-II-antistoffer for påvisning av Pf-infeksjon, og C-båndet er belagt med geit-anti-muse IgG.
Under analysen dispenseres et tilstrekkelig volum av blodprøven i prøvebrønnen (S) på testkassetten, en lyseringsbuffer tilsettes bufferbrønnen (B).Bufferen inneholder et vaskemiddel som lyserer de røde blodcellene og frigjør ulike antigener, som migrerer ved kapillærvirkning over stripen som holdes i kassetten.Pv-LDH hvis det finnes i prøven vil binde seg til Pv-LDH-gullkonjugatene.Immunkomplekset fanges deretter på membranen av det forhåndsbelagte anti-Pv-LDH-antistoffet, og danner et burgunderfarget Pv-bånd, som indikerer et Pv-positivt testresultat.Alternativt vil pHRP-II hvis det finnes i prøven binde seg til pHRP-II-gullkonjugatene.Immunkomplekset fanges deretter på membranen av de forhåndsbelagte anti-pHRP-II-antistoffene, og danner et burgunderfarget Pf-bånd, som indikerer et Pf-positivt testresultat.Fravær av testbånd antyder et negativt resultat.Testen inneholder en intern kontroll (C-bånd) som skal vise et burgunderfarget bånd av immunkomplekset til geit-anti-muse-IgG/muse-IgG (anti-Pv-LDH og anti-pHRPII)-gullkonjugater uavhengig av fargeutviklingen på noen av testbåndene.Ellers er testresultatet ugyldig og prøven må testes på nytt med en annen enhet.
